类器官用基质胶在4°C条件下为液态,但在加热到37°C时呈凝胶状态。基质胶凝固后,重新放回4°C过 夜,基质胶可再次液化。(小提示:基质胶液化,建议将基质胶放4°C 冰箱的冰盒里,保持温度稳定,基质胶液化完)。适用于类器官生长、分化、代谢和毒理学研究,体内和体外血管生成实验和免疫缺陷小鼠成瘤实验。
类器官(organoids)是一种利用具有干性潜能的细胞体外培养出的3D细胞培养物。由于与对应的器官拥有高度相似的组织学特征,具有自我更新和自我组织能力,并能重现该器官的部分生理功能,因此类器官可作为多种疾病的体外模型,在干细胞与发育、再生医学、疾病研究、药物开发和精准医疗等多个方面拥有广泛的应用前景。类器官在体外培养时,由于周期较长,培养过程中注意事项较多,操作较为繁琐,在操作过程中难免会遇到些许"疑难杂症"导致实验失败。
如何选择构建类器官的来源细胞?
答:理论上所有类器官都可以选择从ESC/IPSC来构建,部分类器官可以选择从组织中分离成体干细胞来构建,成体干细胞来源的类器官其构建周期短,体外传代次数多,相对而言构建成本低;根据实验需求,如果要通过类器官模型来研究器官的发育,需要对起始细胞进行基因编辑,一般都是通过ESC/IPSC来构建类器官。
注意事项:
类器官用基质胶在温度高于10°C时就会开始凝固成胶,所以尽量在冰上操作基质胶。类器官 传代时,如果为了避免酶对类器官造成影响,可直接用4°C预冷的基础培养基对基质 胶进行缓慢吹打,即可将类器官从基质胶中释放出来。