matrigel基质胶的使用方法

　　

　　产品特性：

　　Matrigel基质会有色差变化（淡黄色到深红色），是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的，但是与5％CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。细胞可在0.5mm厚度的Matrigel基质层表面生长，也可在1mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层，可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的分化研究。

　　

　　matrigel基质胶的使用方法：

　　特别注意：基质胶在22-35℃能够快速成胶。为了保证Matrixgel基质的成胶性能与稳定性，最终稀释浓度不应低于3mg/ml（液的浓度因批次不同有差异）。可用无血清培养基来稀释Matrixgel，稀释后需要立即使用。

　　A.薄胶制备方法

　　1）融化后，用预冷的枪头混匀Matrixgel基质。

　　2）将需要使用的培养板置于冰上，按50μL/cm2生长面积的浓度加入Matrixgel基质。

　　3）在37℃放置30分钟，此时平板即可使用。

　　

　　B.厚胶制备方法

　　1）融化后，用预冷的枪头混匀Matrixgel基质。

　　2）将需要使用的培养板置于冰上，将培养的细胞与Matrixgel基质混合，用遇冷的枪头使细胞悬浮均匀。按照150－200μL/c的浓度加入Matrixgel基质。

　　3）在37℃放置30分钟，此时即可加入细胞培养液。细胞也可生长在此厚胶的上层。

　　

　　C．薄层包被方法

　　1）融化后，用预冷的枪头混匀Matrixgel基质。

　　2）采用无血清培养基稀释Matrixgel基质到需要的浓度。建议根据具体的实验做个梯度实验，从而确定最佳的包被浓度。

　　3）将稀释的Matrixgel基质加入需要包被的培养器皿中，包被量至少覆盖细胞的所有生长表面。室温下孵育1小时。

　　4）去除未凝固结合的Matrixgel基质，用无血清培养基轻轻地冲洗。此时平板即可使用。